NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液
NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán)素法) 即用型液體試劑 D6103-2×10ml
成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán)素法)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
在成骨分化過(guò)程中,其最基本的生物學(xué)特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟,而礦化結(jié)節(jié)是成骨細(xì)胞分化成熟的標(biāo)志,同時(shí)也是成骨細(xì)胞行使成骨功能的主要形態(tài)學(xué)表現(xiàn),觀察成骨細(xì)胞的礦化結(jié)節(jié)是研究成骨細(xì)胞分化的常用手段之一。 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色常用方法有四環(huán)素法和茜素紅S法,四環(huán)素染色法是利用四環(huán)素與礦化結(jié)節(jié)中的鈣鹽形成熒光的磷酸復(fù)合物,可用熒光顯微鏡觀察。
NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液
產(chǎn)品組成:
編號(hào) 名稱 | D6103 3×10ml | Storage |
試劑(A):四環(huán)素溶液 | 10ml | -20℃避光 |
(B):Ob固定液 | 30ml | 4℃避光 |
試劑(C):DAPI染色液 | 10ml | -20℃避光 |
使用說(shuō)明書 | 1份 |
自備材料:
1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無(wú)鈣鎂)
2、培養(yǎng)基
3、蒸餾水
4、熒光顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
1、成骨細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng),yi酶消化,接種培養(yǎng)于6孔板中,每孔有1x105個(gè)細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基中添加1%-2%四環(huán)素溶液,細(xì)胞連續(xù)觀察、換液,培養(yǎng)14天。
3、小心吸除培養(yǎng)液,磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次。
4、加入足量Ob固定液固。
5、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2。
6、加入DAPI染色液染色5-8min。
7、輕輕吸除染色液,用磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次。
8、直接在熒光顯微鏡快速觀察,或抗熒光封片劑封片后再觀察。
染色結(jié)果:
鈣結(jié)節(jié) | 粉紅色 |
注意事項(xiàng):
1、四環(huán)素溶液為無(wú)菌溶液,可以一次性分裝小份保存,注意避免染菌;使用時(shí)常溫溶解后與培養(yǎng)基按1:100比例混合后使用。
2、Ob固定液宜揮發(fā),開(kāi)啟后應(yīng)密封保存。
3、DAPI染色后應(yīng)盡快觀察,以免熒光消失,影響觀察。也可以用抗熒光淬滅封片劑處理。
4、DAPI不宜反復(fù)凍融,否則容易失效。且對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意做好防護(hù)。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6個(gè)月有效。
相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 |
C0802 | 磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無(wú)鈣鎂) |
D5806 | 蘇木素伊紅(HE)染色液) |
D8407 | 瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液 |
P0880 | Tris-HCl 緩沖液(1mol/L,pH6.8) |
P2813 | 考馬斯亮藍(lán)快速染色液 |
P9840 | Western blot 一抗稀釋液 |
T0513 | 葡萄糖檢測(cè)試劑盒(GOD-POD 比色法) |
NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液